抗凝剂的选用
临床血液学检验中常用的抗凝剂有以下3种。
1.枸橼酸钠（柠檬酸钠）枸橼酸能与血液中的钙离子结合形成整合物，从而阻止血液凝固。市售枸橡酸钠多含2分子结晶水，相对分子质量为294.12，常用浓度为109mmol/L（32g/L）。枸橼酸钠与血液的比例多采用1:9（V:V），常用于凝血象和红细胞沉降率测定（魏氏法血沉测定时抗凝剂为1:4，即抗凝剂0.4ml加血1.6ml）。
2.乙二胺四乙酸二钾（a·k22h2O，MW404.47）抗凝机制与枸酸钠相同。全血细胞分析用EDTA·K21.5~2.2mg可阻止1ml血液凝固。适用于全血细胞分析，尤其适用于血小板计数。但由于其影响血小板聚集及凝血因子检测，故不适合做凝血象和血小板功能检查。
3.肝素是一种含有硫酸基团的黏多糖，相对分子质量为15000，与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合，促进其对凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、X和凝血酶活性的抑制，抑制血小板聚集从而达到抗凝。通常用肝素钠盐或锂盐粉剂（125U=1mg）配成1g/L肝素水溶液，即每毫升含肝素1mg。取0.5ml置小瓶中，3750℃烘干后，能抗凝5ml血液。适用于红细胞比容测定，不适合凝血象和血液学一般检查，因其可使白细胞聚集，并使血涂片染色后产生蓝色背景。
二、血涂片制备
1.器材清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片（25mm×75mm，厚度为0.812mm）
2.操作血涂片制备方法很多，目前临床实验室普遍采用的是手工推片法，在玻片近一端1/3处，加一滴（约0.05ml）充分混匀的血液，握住另一张边缘光滑的推片，以30°~45°角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。
3.附注
（1）血涂片通常呈舌状或楔形，分头、体、尾三部分。
（2）推好的血涂片应在空气中晃动，使其尽快干燥。天气寒冷或潮湿时，应于37℃恒温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。
（3）涂片的厚薄、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及红细胞比容有关。一般认为血滴大、角度大、速度快则血膜厚；反之则血膜薄。红细胞比容高于正常时，血液黏度较高，保持较小的角度，可得满意结果；相反，红细胞比容低于正常时，血液较稀，则应用较大角度、推片速度应较快。
（4）血涂片应在1h内染色或在1h内用无水甲醇（含水量<3％）固定后染色
（5）新购置的载玻片常带有游离碱质，必须用浓度约1mol/LHCl浸泡24h后，再用清水彻底冲洗，擦干后备用。用过的载玻片可放入含适量肥皂或其他洗涤剂的清水中煮沸20min，洗净，再用清水反复冲洗，蒸馏水最后浸洗，擦干备用。使用时切勿用手触及玻片表面。
（6）血液涂片既可直接用非抗凝的静脉血或毛细血管血，也可用EDTA抗凝血制备。由于EDTA能阻止血小板聚集，故在显微镜下观察血小板形态时非常合适。
（7）使用EDTA·K2抗凝血液样本时，应充分混匀后再涂片。抗凝血样本应在采集后4h内制备血涂片，时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态改变。注意制片前，样本不宜冷藏。