操作方法与步骤
1．氯化三苯四氯唑（TTC）法
（1）浸种。将待测种子在30～35℃温水中浸种（采用万寿菊、一串红、矮牵牛、翠菊、千日红、百日草等花卉种子，吸水速度快，时间短）以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。
（2）显色。取吸胀的种子100粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于两只培养皿中，加入适量的0.5％TTC溶液，然后置于30℃恒温箱中0.5～1h。结果，凡胚被染为红色的是活种子。将另一半在沸水中煮5min杀死种胚，作同样染色处理，作为对照观察。
（3）计算活种子的百分率，再与实际发芽率作一比较，看是否相符。2．红墨水染色法
（1）浸种。同TTC法。
（2）染色。取已吸胀的种子200粒，沿胚和中线切为两半，将一半置于培养皿中，加入5％红墨水（以淹没种子为度），染色5～10min（温度高时时间可短些）。染色后，倒去红墨水液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止。检查种子死活。结果凡种胚不着色或色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。可用沸水杀死的种子作对照观察。
（3）计数种胚不着色或着色浅的种子数，算出发芽率。3．纸上荧光法
（1）将完整无损的种子（如十字花科植物的种子）100粒，于25～30℃水中浸泡2～3h。
（2）把已吸胀的种子，以3～5mm间隔整齐地排列在培养皿中的润湿滤纸上，滤纸上水分不能过多，以免荧光物质流散。培养皿可以不必加盖，放置1.5～2h，取去种子，将滤纸阴干。取出的种子仍按原来顺序排列在另一皿中（以备验证）。
（3）将滤纸置于紫外荧光灯下进行观察，观察如能在暗室中进行，则效果更好。
（4）结果：有的放过种子的位置上可见一荧光圈。要确证这是死种子，可将这些种子集中在一只培养皿中，让不产生荧光的种子留在另一皿中。维持合适湿度，让其自然发芽。
（5）3～4d后记录每皿中发芽种子数。
这种方法的成败，首先决定于种子中荧光物质的存在，其次决定于种皮的性质。有的种子无论有否发芽能力，一经浸泡，即有荧光物质透出，大豆即属此类，也有的由于种皮的不透性，无论种子死活，都不产生荧光圈，许多植物的种子都会碰到这种个别现象，此时只要用机械方法擦伤种皮，可重复验证。相反，有时由于收获时受潮种皮已破裂，都会产生荧光圈，试验时都应该注意。最好将浸泡液进行检查，没有荧光则适于做试验材料。